Le 12 octobre 2021, l'équipe de Zhou Xi de l'institut de Wuhan du laboratoire de clé de virologie/état de la virologie, l'académie des sciences chinoise et la Lulu Team du ministère de l'éducation de la virologie moléculaire médicale/du laboratoire principal de la santé et de la Commission de santé de l'université de Fudan conjointement éditée en magazine de « immunité » ont intitulé le papier « inhibition de recherches du dispositif antiparasite viral des protéines de RNAi par des designerpeptides se protège contre l'infection enteroviral in vivo » indique pour la première fois que la conception rationnelle des inhibiteurs de polypeptide spécifiquement aux dispositifs antiparasites de RNAi d'entérovirus de cible peut effectivement casser l'effet de VSR du virus. L'inhibition de RNAi libère entièrement la fonction immunisée antivirale de RNAi, qui est une preuve forte que le mécanisme immunisé de RNAi existe toujours dans les mammifères. En raison de la bonne activité antivirale et de la sécurité élevée montrées par ce mécanisme immunisé chez les cellules et les animaux, son potentiel pour le développement clinique est extrêmement haut.
Guerre immunisée : les deux côtés participant à la guerre à tout moment, un champ de bataille avec des moyens fréquents
Depuis le début de la vie, ce n'est pas la sorte bonjour et moi, mais le champ de bataille cruel de votre vie et mort. Vous sort de mon gazon ou vous pour rester et être une partie de moi.
Des épines de macro-échelle, klaxons, griffes, et dents, à la phagocytose, à la dissolution, et à l'empoisonnement au niveau cellulaire, à la coupe, à l'interférence, et à la dégradation des structures moléculaires ; d'in vitro à in vivo, d'extracellulaire à intracellulaire : Accueil à la bataille de Difen A de la bataille de la vie et de la mort-un de l'immunité qui commence à tout moment.
RNAi - un mécanisme immunisé antiviral naturel et efficace
Dans cette guerre sans restriction, il y a un mécanisme immunisé (fortement conservé) naturel (les affaires principales règlent l'expression du gène, et les affaires latérales sont contre l'invasion de virus), efficace, stable et omniprésent - RNAi (interférence d'ARN), qui est considéré dans la la fonction antivirale la plus importante dans les champignons, les usines et les invertébrés. En bref, l'ARN bicaténaire (dsRNA) produit par la reproduction de virus est identifié par la protéine de Dicer de voie de RNAi et fendu dans le petit ARN de intervention virus-dérivé (siRNA, vsiRNA viraux), et puis assemblé dans le complexe de amortissement causé par l'ARN (complexe de amortissement causé par l'ARN). complexe, RISC), visant de ce fait la dégradation de l'ARN viral. Également, la plupart des virus ont également évolué les mécanismes antagoniques correspondants, c.-à-d., pour échapper à l'immunité antivirale de RNAi par les dispositifs antiparasites viraux de codage de RNAi (dispositif antiparasite viral de RNAi, VSR).
Découverte des mécanismes immunisés de RNAi dans les mammifères
Cependant, puisque le vsiRNA constitué par le décolleté de l'ARN viral n'a pas été trouvé en cellules mammifères, le mécanisme immunisé de RNAi est considéré « une relique évolutionnaire » qui a été abandonnée après que les mammifères aient développé d'autres mécanismes antiviraux. Cependant, depuis 2017, un certain nombre d'études relatives ont trouvé un grand choix de VSRs dérivé des virus, confirmant que le mécanisme immunisé de RNAi ne disparaît pas en cellules mammifères, mais sont empêchées par des virus. En même temps, avec la découverte des protéines de VSR codée par un grand choix de virus humains importants, le mécanisme moléculaire de son antagonisme de voie de RNAi a été indiqué.
peptides VSR-visés : une nouvelle direction pour le développement de drogue
Dans cette étude, l'équipe de recherche a innovateur conçu deux peptides de VSR-optimisation (VSR-visant peptides, VTP), P1 et P2, basés sur les ordres A1 et A2 hélicoïdaux de la protéine de l'entérovirus EV-A713A VSR. En détectant l'accumulation de l'ARN EV-A71 dans les variétés de cellule choisies, on lui a montré que P1 et P2 ont effectivement empêché la reproduction de virus d'une façon dépendante de la dose.
Puis, selon les résultats expérimentaux, une série de peptides a été encore synthétisée concernant l'ordre P2 avec un meilleur effet, et on l'a constaté que l'isoform modifié partransformation D-inverse (ER-DRI) du peptide ER a exercé le meilleur effet inhibiteur sur la reproduction virale d'ARN. Afin de confirmer que cette série de cible de VTPs et inactiver EV-A71 3AVSR et ouvrir l'activité antivirale de RNAi, ARN total des cellules infectées a été extraite et profond-ordonnancée. Les résultats ont prouvé que les vsiRNAs détectés ont été en effet dérivés d'EV-A71. Parmi eux, la purification et l'extraction de l'ARN du virus EV-A71 en cellules infectées ont été exécutées kit viral d'isolement utilisant de Qiagen et de Foregene ARN. (Ce kit emploie la colonne et la formule de rotation développées par Foregene, qui peut efficacement extraire l'ARN viral de grande pureté et de haute qualité à partir des échantillons tels que le plasma, le sérum, le liquide corporel sans cellule, et la culture cellulaire
surnageant. Le kit ajoute spécifiquement l'acrylamide linéaire, qui peut facilement capturer un peu d'ARN des échantillons. La colonne réservée à l'ARN peut efficacement lier l'ARN. Le kit peut traiter un grand nombre d'échantillons en même temps.
Le kit entier ne contient pas la RNase, ainsi l'ARN purifié ne sera pas dégradé. Le tampon viRW1 et le tampon viRW2 peuvent s'assurer que le sans acide nucléique viral obtenu de la protéine, de la nucléase ou d'autres impuretés, qui peuvent être employées directement pour des expériences en aval de biologie moléculaire.)
Kit d'isolement d'ARN de Vrial
En même temps, VTP n'a pas pu exercer l'effet antiviral sur le virus EV-A71 avec la mutation et la suppression de la fonction 3A-VSR, aussi bien qu'en cellules de Dicer1 ou d'AGO2-deficient atteint du virus EV-A71. On le montre que son mécanisme d'action en effet vise 3A-VSR et dépend de la voie de RNAi.
Pour étudier le potentiel préclinique d'ER-DRI, l'équipe de recherche a évalué son effet antiviral chez les souris EV-A71 infectées par le virus par l'injection intrapéritonéale des peptides fluorescent marqués. Les résultats ont prouvé qu'ER-DRI a également stimulé l'immuno-réaction antivirale de RNAi chez les souris, a empêché la reproduction d'EV-A71, a amélioré les symptômes cliniques des souris infectées, et a réduit la mort des souris provoquées par l'infection. En même temps, l'épreuve de toxicité aiguë a prouvé qu'ER-DRI n'a eu aucun mal évident à la santé des souris.
Le mécanisme immunisé de RNAi débloqué par VTPs est assez puissant pour négocier l'activité antivirale efficace, clairement démontrant l'importance physiologique et la faisabilité thérapeutique de RNAi en tant qu'immunité antivirale dans les mammifères. En outre, cette étude a démontré que VSRs sont les cibles druggable, fournissant une stratégie nouvelle pour viser VSRs pour la thérapie antivirale, et les peptides comme ER-DRI tiennent la promesse considérable en tant que VTDs classe première pour des infections d'entérovirus.
Lien d'article : L'inhibition du dispositif antiparasite viral des protéines de RNAi par des peptides de concepteur se protège contre l'infection enteroviral in vivo - PubMed (nih.gov)
Lien de produit : Kit viral d'isolement d'ARN
Votre message doit contenir entre 20 et 3 000 caractères!
