Prémélange superbe de Lnc-droite HeroTM I (avec le gDNase) pour la synthèse de cDNA de premier-brin du lncRNA Cat.No.RTL-09098/09099

Lnc-droite HeroTM I (avec le gDNase)

Prémélange superbe pour la synthèse de cDNA de premier-brin du lncRNA

Cat.No.RTL-09098/09099

Description :

Lnc-droite HeroTM I (avec le gDNase) est un système inverse de transcription particulièrement développé pour que le lncRNA enlève rapidement la contamination genomic d'ADN. le mélange 5×gDNase peut rapidement enlever le génome restant en ARN à 42°C pendant 2 minutes, évitant effectivement l'interférence du génome sur des résultats de qPCR.

Le mélange de 5×L-RT HeroTM contient l'inverse Transcriptase de Foregene LncRNA particulièrement développé par Foregene, qui est un nouveau type de transcriptase inverse spécifiquement pour le lncRNA et d'autres calibres complexes de long ARN, avec une affinité plus forte d'ARN et une efficacité plus élevée d'enregistrement d'inversion. Le système optimisé fait le taux inverse de transcription plus rapidement et peut facilement transcrire des calibres d'ARN avec le contenu élevé de CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE et la structure secondaire complexe. La première synthèse de cDNA de brin peut être accomplie à 42°C en 15 minutes.

Caractéristiques :

25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns

Composants de kit

L'information composante de kits

Mélange de -5×gDNase : gDNA enlevant l'agent, il est nécessaire d'employer le réactif selon les consignes d'utilisation avant la réaction de droite est exécuté (le contenu interne de glycérol ne peut être gelé, et il ne peut être gelé, qui appartient aux phénomènes normaux).

- MÉLANGE DE 5×L-RT HEROTM : Contient l'inverse Transcriptase de Foregene Lncrna, l'inhibiteur de RNase, DNTPS, Stabilifer, renforceur, optimiseur, (décollement) amorce 18 Oligo).

Features&advantages :

- Capacité efficace d'enlever le gDNA, qui peut enlever le gDNA dans le calibre d'ici 2 minutes.

- Il peut efficacement renverser la transcription du lncRNA. Quand le produit inverse de transcription est soumis au qPCR, la valeur de Ct est inférieure à celle du système inverse conventionnel de transcription.

- Système inverse efficace de transcription, cela prend seulement 15 minutes pour accomplir la synthèse du premier cDNA de brin.

- Calibres complexes : des calibres avec le contenu élevé de CHROMATOGRAPHIE GAZEUSE et la structure secondaire complexe peuvent également être renversés avec le rendement élevé.

- le système inverse de transcription de Haut-sensibilité, les calibres niveau de la page peut également obtenir le cDNA de haute qualité.

- Le système inverse de transcription a la stabilité thermique élevée, la température optimale de réaction est 42℃, et elle a toujours la bonne représentation inverse de transcription à 50℃.

Conditions d'ARN de calibre

Il est le meilleur d'employer l'ARN a extrait à partir des échantillons frais ou préservé à -80 °C.

- Intégrité de calibre : bonne intégrité, aucune dégradation.

- Pureté de calibre : Les IONS, les protéines, l'EDTA, l'éthanol, les phénols et d'autres journaux contenus en ARN affecteront pour renverser l'activité de transcriptase et pour affecter finalement des effets inverses de transcription.

Dosage d'ARN de calibre

- Pour le lncRNA : système total du μl RNA/20 du μg 10ng-1.

- Pour l'ARN général : ARN du μg 0.1pg-1 ou 0.01pg-0.1 système total de μl du μg mRNA/20.

L'information composante de kits

- mélange 5×gDNase : gDNA enlevant l'agent, il est nécessaire d'employer le réactif selon les consignes d'utilisation avant la réaction de droite est exécuté (le contenu interne de glycérol ne peut être gelé, et il ne peut être gelé, qui appartient aux phénomènes normaux).

- MÉLANGE DE 5×L-RT HEROTM : Contient l'inverse Transcriptase de Foregene Lncrna, l'inhibiteur de RNase, DNTPS, Stabilifer, renforceur, optimiseur, (décollement₎ amorce ₁₈ Oligo).

Précautions : (Lisez svp les précautions soigneusement avant d'employer le kit)

- Le calibre recommande d'employer les échantillons frais ou l'ARN a préservé au-dessous de -80 le ° C (l'ARN devrait éviter gel-dégel répété, n'assurant l'intégrité d'ARN, aucune dégradation).

- Afin d'éviter la pollution de RNASE, l'opération expérimentale est effectuée dans l'espace sans RNase ; la tête d'arme à feu et la centrifugeuse d'ACP doivent être garanties pour être sans RNase ; et portez les gants jetables et les masques.

- Avant utilisation, le MÉLANGE de mélange de GDNase de 5 × et 5 de × L-RT HEROTM sont placés sur la glace pour la faire complètement fondu, et la balle légère est mélangée ; le système est formulé, fonctionne svp sur un bain de glace pour améliorer la représentation du kit, améliorent la représentation de la spécificité d'amplification d'ACP de kit.

- 5 le MÉLANGE du × L-RT HEROTM a ajouté une amorce inverse optimisée de transcription de rapport sans n'ajouter aucune amorce aux amorces supplémentaires supplémentaires.

- Pour le calibre complexe d'ARN de la structure secondaire, la température de réaction peut être grimpée jusqu'50 au ° C

Déroulement des opérations :

Durée de conservation de stockage et :

Les kits superbes d'ACP de prémélange devraient être stockés à -20°C. stockent le produit dans un réfrigérateur de la température constante à -20°C juste après le reçu. Si les conditions de stockage sont appropriées, le produit ne dégradera aucune représentation au cours de la période d'une année de validité.

Guide d'analyse de problème

Ce qui suit est une analyse des problèmes qui peuvent être produits dans l'utilisation des kits de série de Lnc-droite HeroTM I (avec le gDNase), espérant être utile à vos expériences. En outre, nous avons consacré le support technique pour vous aider avec d'autres problèmes expérimentaux ou techniques au delà des consignes d'utilisation et des questions. Si vous avez n'importe quels besoins, svp contactez-nous : 028-83361257 ou email : Tech@foregene.com.

Amplification non spécifique

1. Conception déraisonnable d'amorce

Recommandation : Amorces de conception selon des conceptions de bases d'amorce.

2. Résidus de génome.

Suggestion : Assurez-vous que la première étape de la température de réaction d'enlèvement de gDNA est 42°C, et le temps de réaction peut également être prolongé à 5min.

Aucun signal d'amplification par droite-qPCR

1. L'ARN est dégradé.

Recommandation : Le matériel pour l'extraction d'ARN devrait être aussi frais comme possible, et l'ARN de haute qualité et de grande pureté devrait être employé.

2. L'ARN contient des inhibiteurs.

Recommandation : Les inhibiteurs inverses de transcription incluent généralement le SDS, les sels de guanidine, l'EDTA, etc. On lui recommande de laver le précipité d'ARN avec de l'éthanol de 70% pour enlever les inhibiteurs.

3. Questions de conception d'amorce.

Recommandation : Selon la conception de bases d'amorce, remodelez les amorces pour l'inspection.

La bande de cible apparaît dans le contrôle vide

1. Contamination des outils ou des réactifs fonctionnants.

Recommandation : Tous les réactifs ou équipement pour l'expérience devraient être stérilisés à l'autoclave. Soyez soigneux et doux en manipulant pour empêcher des échantillons d'ADN d'être sucée dans la pipette ou vous êtes renversé hors du tube à centrifuger.

2. La contamination s'est produite pendant la préparation du système de réaction d'ACP.

Recommandation : Prenez les précautions nécessaires en manipulant, comme : gants de port de latex, utilisant des astuces de filtre. Employez le mélange en temps réel d'ACP dans un système à l'épreuve des contaminations.

3. Les amorces sont dégradées.

Suggestion : Employez l'électrophorèse de SDS-PAGE pour détecter si les amorces sont dégradées, et la remplacez par de nouvelles amorces pour des expériences de détection de fluorescence.